養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒[風(fēng)途耗材介紹]FT-ZWSJ2 Sada na zis?ovanie afrického moru o?ípanych pre farmy養(yǎng)殖場(chǎng)用非洲豬瘟檢測(cè)試劑盒[風(fēng)途耗材介紹]FT-ZWSJ2:ASF沒有相應(yīng)的治療措施和有效的疫苗,對(duì)于該病的控制主要依賴快速實(shí)驗(yàn)室診斷和嚴(yán)格的防控措施。因此,建立ASF快速、準(zhǔn)確的診斷方法尤為重要。1921年,非洲豬瘟早在肯尼亞報(bào)道,引起家豬100%的死亡。此后,該病一直在非洲流行,直到1957年,由于給豬飼喂航班上的垃圾和剩余食物引起該病在葡萄牙的爆發(fā)[6]。非洲豬瘟隨后在歐洲的其他一些國家蔓延,包括馬耳他(1978)、意大利(1967、1980)、法國(1964、1967、1977)、比利時(shí)(1985)和荷蘭(1986)。
核酸DNA提取試劑盒(柱膜法)使用說明書
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱:病毒DNA提取試劑盒
英文名稱:Extraction Kit for Virus DNA
【預(yù)期用途】
本試劑盒主要用于疑似病毒等病原感染抗凝血、血淸、拭子、組織、飼料及環(huán)境中的病毒DNA的提取,純化的核酸可適用于各種常規(guī)操作及PCR試驗(yàn)。
【試劑盒組分】
I、試劑盒組成及貯藏條件
名稱 | 20 T | 50 T |
1、吸附柱 | 20個(gè) | 50個(gè) |
2、收集管 | 20個(gè) | 50個(gè) |
3、裂解液 | 5 mL | 11 mL |
4、洗液I | 13 mL | 32 mL |
5,洗液II | 13 mL | 32 mL |
6.洗脫液 | 1.2 mL | 3 mL |
2、 保存條件及有效期:室溫下保存,有效期12個(gè)月.
3、 需自備材料:無水乙醇、1.5 mL無菌離心管、1.5 mL無菌離心管(長(zhǎng)臂型)、生理鹽水、研缽、無菌
1mL, 2OOuL、10uL槍頭、記號(hào)筆等。
【操作步驟】
一、樣品制備
1、 血液樣品:抗凝血樣品置離心管中,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上層血漿;非抗凝血樣品置離心 管中,待凝固后,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上層血清,置于滅菌離心管中,編號(hào)待檢。
2、 組織樣品:采集脾臟、肝臟、淋巴結(jié)、扁桃體等病變組織樣品0.1g.組織勻漿器或研缽中充分勻漿或研磨,加入1 mL生理鹽水混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心骨中,編號(hào)待檢。
3、 口腔液:進(jìn)食前用拭子/口腔液采集袋或自制棉線綁紗布團(tuán)吸引動(dòng)物咀嚼,收集口腔液大于 500uL, 8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢。
4、 飼料:取適量研磨后的飼料(約0.2g),放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP 管屮,振蕩混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢.
5、 灰塵:用無菌棉簽蘸取適量環(huán)境表面上的灰塵,放入含1 mL生理鹽水或PBS(PH為7.4)緩沖液的2 mL EP管中,振蕩混勻,8000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,取上清于滅菌離心管中,編號(hào)待檢。
二、DNA的提取
1、取裂解液200uL加入無核酸酶1.5 mL離心曾屮,分別加入血漿/血清/組織液等樣品液200uL. 震蕩混勻10秒或顛倒混勻10次,室溫放置5分鐘(如果室內(nèi)溫度較低時(shí).需放置25C水浴溫育),再加入200uL無水乙醇,顛倒混勻10秒;若樣品渾濁則先12000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘處理,取上清液,以避免堵塞柱子;
2、 將液體轉(zhuǎn)入套有收集管的吸附柱中, 12000rpm離心1分鐘:
3、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液I , 12000 rpm離心1分鐘;
4、 棄收集管液體,向吸附柱中加600uL洗液II, 12000 rpm離心I分鐘;
5、 棄收集管液體,12000 rpm離心2分鐘,以*去除殘留洗液;
6、將吸附柱轉(zhuǎn)入新的無核酸酸1.5mLEP管(長(zhǎng)臂型)中,向柱中央滴加50 uL洗脫液,靜置1分鐘, 12000 rpm離心1分鐘,EP管中液體即為病毒DNA。
【注意事項(xiàng)】
1、 實(shí)驗(yàn)前諾仔細(xì)閱讀本試劑盒說明書,嚴(yán)格按照操作步驟執(zhí)行.在操作過程中對(duì)時(shí)間、試劑體積等 粘確控制可以獲得好的結(jié)果。
2, 樣本應(yīng)新鮮采集使用,或低溫運(yùn)輸儲(chǔ)存;
3, 樣本具有潛在感染風(fēng)險(xiǎn),核酸的提取應(yīng)在核酸提取實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜中進(jìn)行。
4、 核酸提取冇關(guān)耗材確保高溫滅菌,提取后核酸盡快進(jìn)入下一步試驗(yàn)或冷凍保存待用。
5, 試劑使用前應(yīng)混合均勻,試劑具有一定腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)戴手套、做好防護(hù)。
6. 低溫下裂解液出現(xiàn)結(jié)晶數(shù)屬正常現(xiàn)象,可在60°C水浴加熱助溶后使用。
7、 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄物應(yīng)及時(shí)收集,遠(yuǎn)離PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行無害化處理。
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